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產品分類人甲狀腺結合前白蛋白(PA)天然高純抗原產品純度:純度95%儲存條件:-20℃有效期:12個月概述:經過多種方法純化制備而得,可用于質控品本產品僅供科研實驗用,不做其他用途。
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人甲狀腺結合前白蛋白(PA)天然高純抗原
產品純度:純度95%
儲存條件:-20℃
有效期:12個月
概述:經過多種方法純化制備而得,可用于質控品
背景介紹:
人甲狀腺結合前白蛋白(PA),也被稱為轉甲狀腺素蛋白(transthyretin, TTR),是一種由肝臟細胞合成并分泌到血漿中的蛋白質。其分子量約為5.4萬,具有較短的半衰期,大約為1.9天。由于這一特性,前白蛋白在血漿中的濃度變化對于反映人體的營養狀況、肝功能狀態以及某些疾病的進展具有較高的敏感性134。
作為甲狀腺素的結合蛋白,前白蛋白能夠與甲狀腺素(T4)結合,形成復合物,從而參與甲狀腺素的運輸和調節。此外,前白蛋白還具備其他重要的生理功能,如結合并運輸維生-素A,參與機體的免疫調節等。
人甲狀腺結合前白蛋白的天然高純抗原在生物醫學領域具有廣泛的應用價值。它不僅可以用于制備高靈敏度的檢測試劑,用于疾病的早期診斷和監測,還可以作為研究蛋白質結構和功能的重要工具
重組蛋白抗原制備常用的有原核表達系統、酵母表達系統、真核表達系統,真核表達系統主要有昆蟲細胞-桿狀病毒表達和哺乳動物細胞表達系統等。重組表達制備抗原一般會在蛋白序列加上一段用于純化的標簽,除了便于純化還可以增加蛋白的可溶性和分子量更利于抗體制備,常用的標簽主要有GST、6*His、Myc、MBP、Flag、Fc等。根據下游實驗對蛋白質的使用需求,如有需要可以切除標簽;如不切除,后期抗體在使用時如遇標簽抗體干擾,可先用標簽蛋白免疫吸附去除高免血清中針對標簽的抗體。重組蛋白與天然蛋白相比,在構象、修飾和蛋白活性上還是有差距的,真核與原核相比,更接近于天然蛋白;這類抗原制備一般適合于Western Blot、IHC、ELISA以及免疫層析、膠體金和免疫比濁等診斷類抗體的制備,只不過制備的過程需要用含內源性蛋白標本進一步篩選驗證。
抗原制備最為重要的環節就是抗原的純化,通過重組蛋白制備抗原當然也不例外,在項目開始之前這個難度往往被忽視,科研人員往往認為既然在抗原設計的時候融合了純化標簽,純化過程按照標準流程操作,得到高純度抗原就是水到渠成,然而結果往往不如人意;諸如,明明帶了標簽的蛋白掛不上純化柱子、洗脫下來的蛋白雜帶比目的帶還多、目的蛋白結合在柱子上洗脫不下來等等。蛋白純化在業界都是一大難題,一個蛋白的純化往往會用到幾種方案和策略。根據福因德生物技術團隊的經驗,純化出一個符合抗體制備要求的重組抗原蛋白至少要用2-3種手段,常用的手段有離子交換層析、標簽親和層析、凝膠過濾分離層析等等。
人甲狀腺結合前白蛋白(PA)天然高純抗原